流式細(xì)胞儀是一項(xiàng)集激光技術(shù)，電子物理技術(shù)，光電測(cè)量技術(shù)，計(jì)算機(jī)技術(shù)及細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)，單克隆抗體技術(shù)為一體的新型高科技儀器。從二十世紀(jì)八十年代至今，世界上生產(chǎn)流式細(xì)胞儀的廠家?guī)捉?jīng)變遷，BC & BD仍在，新玩家不斷進(jìn)入，并購(gòu)重組各取所需，它們生產(chǎn)各種不同性能和功能的流式細(xì)胞儀?？傮w而言，呈現(xiàn)出以下的發(fā)展趨勢(shì)：

1、應(yīng)用對(duì)象從細(xì)胞到顆粒

一般而言，流式細(xì)胞儀檢測(cè)的對(duì)象是細(xì)胞，而且是呈獨(dú)立狀態(tài)的懸浮于液體中的細(xì)胞，即單細(xì)胞懸液。組織和器官中的細(xì)胞，必須用各種方法制備成單細(xì)胞懸液，才能進(jìn)行檢測(cè)。細(xì)菌、浮游生物等也可以用流式細(xì)胞儀分析。一些不是細(xì)胞的單個(gè)粒子，如病毒、細(xì)胞核、染色體、原生質(zhì)體等也是流式細(xì)胞儀的檢測(cè)對(duì)象。實(shí)際上，用“顆粒”而不僅僅是“細(xì)胞”來(lái)定義流式細(xì)胞儀的檢測(cè)對(duì)象，顯然更有代表意義。因?yàn)榱魇郊?xì)胞儀可以將“顆粒”視同為“細(xì)胞”來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，在特制的微球上包被抗原，抗體或核酸探針，以微球?yàn)檩d體來(lái)檢測(cè)各種可溶性蛋白、細(xì)胞因子、自身抗體、特定的核酸序列等，從而使流式細(xì)胞儀的檢測(cè)對(duì)象擴(kuò)展到分子范圍。

2、 檢測(cè)顆粒尺度大大拓寬

常規(guī)流式細(xì)胞儀檢測(cè)顆粒的范圍為0.5-50μm。電荷分選流式細(xì)胞儀檢測(cè)顆粒范圍與噴嘴直徑等相關(guān)，最大應(yīng)到噴嘴直徑的1/3-1/2，目前最大直徑的噴嘴為200μm。通過(guò)光路優(yōu)化，采用多角度光散射，使用特殊熒光探針，甚至加裝紫色激光收集散射光信號(hào)，有些流式細(xì)胞儀可以實(shí)現(xiàn)0.2μm顆粒與噪音信號(hào)的鑒別。Apogee著力于微顆粒分析，其A50-Micro plus散射光的檢測(cè)低限至80nm，可用于循環(huán)微粒，外泌體及特殊微生物檢測(cè)。

3、多種流路技術(shù)商品化

絕大多數(shù)流式細(xì)胞儀基于鞘液流體動(dòng)力學(xué)模式。因?yàn)樨?fù)壓進(jìn)樣省去了龐大的壓縮氣源，可以靈活使用各種上樣管，已經(jīng)成為幾乎所有公司新儀器的選擇。一般認(rèn)為，流式細(xì)胞儀采用毛細(xì)管而非鞘液，容易被大的細(xì)胞或聚集細(xì)胞所阻塞，而且流動(dòng)細(xì)胞難以準(zhǔn)確聚焦，流速難以維持恒定。Guava平臺(tái)easyCyte通過(guò)負(fù)壓進(jìn)樣，采用高壓注射泵與PEEK管路，建立自穩(wěn)流的微毛細(xì)管系統(tǒng)，據(jù)稱(chēng)解決了以上困擾，帶來(lái)的好處是無(wú)需鞘液，產(chǎn)生廢液也少。

4、從相對(duì)計(jì)數(shù)到直接絕對(duì)計(jì)數(shù)

為滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，流式細(xì)胞儀必須采集一定數(shù)量的細(xì)胞，儀器設(shè)定以細(xì)胞數(shù)為停止條件。傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀測(cè)試結(jié)果為相對(duì)計(jì)數(shù)，即目標(biāo)細(xì)胞在某一總體系中的比值。隨著應(yīng)用深入，人們發(fā)現(xiàn)比值的變或者不變，以及變化大小不能反映細(xì)胞的真實(shí)變化，絕對(duì)計(jì)數(shù)，即單位體積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)被證明更具實(shí)際價(jià)值。最早是采用雙平臺(tái)法來(lái)解決以上問(wèn)題，即用血細(xì)胞分析儀來(lái)獲得白細(xì)胞，淋巴細(xì)胞等濃度，再結(jié)合流式細(xì)胞儀測(cè)定的百分比來(lái)計(jì)算被測(cè)細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)值。由于該法需要使用兩種儀器，操作步驟多、變異系數(shù)大，不同實(shí)驗(yàn)室之間的差異也較大，因此應(yīng)用受到限制。后來(lái)人們采用微球法，即用已知濃度的微球作為參比，通過(guò)被測(cè)細(xì)胞和微球的比例關(guān)系來(lái)進(jìn)行絕對(duì)計(jì)數(shù)，但因計(jì)數(shù)微球價(jià)格較為昂貴，實(shí)際應(yīng)用受到限制。近年來(lái)，廠家的共識(shí)回到了測(cè)定進(jìn)樣體積這一思路上來(lái)，替代微球法直接進(jìn)行絕對(duì)計(jì)數(shù)，取得更為精確的結(jié)果。區(qū)別在于不同產(chǎn)品具體測(cè)定技術(shù)的差別。

5、以多色分析為核心的新型光學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展

早期流式細(xì)胞儀的主要應(yīng)用還是細(xì)胞DNA含量測(cè)定，這一技術(shù)對(duì)設(shè)備要求不高，通常配備一個(gè)散射光和一個(gè)熒光信號(hào)的流式細(xì)胞儀就足以應(yīng)付。隨著新型熒光探針的不斷開(kāi)發(fā)和儀器軟、硬件的逐步更新，流式細(xì)胞儀多色熒光分析得到了迅速發(fā)展，包括兩個(gè)方面：

單激光多色，如488nm激光同時(shí)激發(fā)7色，紫色激光同時(shí)激發(fā)10色……多激光：如10激光機(jī)器。也包括兩種新的光學(xué)設(shè)計(jì)機(jī)型：光譜流式，利用特殊的接受裝置收集某范圍內(nèi)的全發(fā)射光譜，無(wú)需補(bǔ)償，區(qū)別發(fā)射光譜重合度高的熒光染料對(duì)。

6、數(shù)據(jù)處理能力不斷提升

隨著數(shù)字化技術(shù)的引入，以及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的升級(jí)，流式細(xì)胞儀的數(shù)據(jù)處理能力得到極大提升。數(shù)據(jù)處理速度：反映數(shù)據(jù)掃描頻率，用Hz表示。處理精度：信號(hào)采集精度，用比特表示，反映采集通道多少。目前儀器一般在20比特（2的20次方，100萬(wàn)通道）以上，最高達(dá)32比特（43億通道）。線性范圍：目前一般在105以上，最高到107。單文件存儲(chǔ)能力：反映文件儲(chǔ)存能力，對(duì)稀有細(xì)胞分析有利。

7、 儀器不斷小型化到微流控

追求小型化，幾乎是所有流式制造商開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品的共識(shí)。“小”意味著節(jié)省空間，容易安裝和轉(zhuǎn)移，“小”更值得期許的是減少樣本體積，降低試劑消耗，提高檢測(cè)速度，以及縮小空間所帶來(lái)的光電及液路的改善。微流控技術(shù)興起于上世紀(jì)90年代，顧名思義就是使用微通道（尺寸為數(shù)十到數(shù)百微米）處理或操縱微小流體。

8、融合顯微成像技術(shù)和流式細(xì)胞術(shù)

細(xì)胞生物學(xué)兩大技術(shù)平臺(tái)分別基于顯微鏡和流式，前者以形態(tài)分析為優(yōu)，可提供詳細(xì)的細(xì)胞圖像信息，但解釋主觀、費(fèi)時(shí)費(fèi)力；后者以統(tǒng)計(jì)學(xué)見(jiàn)長(zhǎng)，卻缺乏成像能力，因此無(wú)法了解亞細(xì)胞定位。

更多醫(yī)療產(chǎn)品設(shè)計(jì)，你還可以電話咨詢  0755-26607051